ACQUITY UPLC BEH Amide色譜柱

南通海箬化學(xué)有限公司

親水作用色譜HILIC

自從2003年，沃特世就已經(jīng)開發(fā)出新的固定相用于親水作用色譜分離，以克服對強極性化合物難以保留和分離的挑戰(zhàn)性問題。基于沃特世BEH顆粒技術(shù)，ACQUITY UPLC BEH Amide柱使用化學(xué)穩(wěn)定耐受的、三鍵鍵合的酰胺基(Amide)鍵合相，HILIC分離穩(wěn)定性好通用性強。

ACQUITY UPLC BEH Amide柱能夠使用廣泛的流動相pH條件(2-12)，從而可以對在極性、結(jié)構(gòu)片段和pKa值性質(zhì)上跨越大的極性分析物混合物實現(xiàn)優(yōu)異的保留與分離。

碳水化合物分析

使用HILIC色譜分離多的化合物之一就是碳水化合物，例如：單糖、二糖、寡糖和多糖。ACQUITY UPLC BEH Amide柱能夠提供以下優(yōu)勢：

×1.7 µm粒徑允許高效快速地分析復(fù)雜樣品

×更強的化學(xué)穩(wěn)定性，允許使用高pH和高溫條件以合并還原性糖差向異構(gòu)體的岔頭峰，使定量更準(zhǔn)確，縮短分析時間。

×色譜柱壽命(pH2-11)長，也增強了分析方法的耐用性。

×與硅膠氨基柱不同，ACQUITY UPLC BEH Amide柱不易生成Schiff堿，從而改善定量準(zhǔn)確性。

×與高pH流動相的兼容性，有助于MS檢測而無需衍生化從而簡化了LC/MS分析前的樣品預(yù)處理工作，并提高分析靈敏度。該柱也與RI、ELSD兼容

沃特世（Waters）的ACQUITY UPLC BEH Amide色譜柱是一款專門設(shè)計用于親水作用色譜（HILIC）模式的液相色譜柱，其核心優(yōu)勢在于解決了Q極性化合物在傳統(tǒng)反相色譜（RPLC）上難以保留的關(guān)鍵問題。以下從技術(shù)特性、應(yīng)用場景等方面對其進行詳細(xì)介紹：

1. 核心技術(shù)與填料特性

雜化顆粒技術(shù)：該色譜柱采用沃特世的亞乙基橋雜化顆粒（BEH，Ethylene Bridged Hybrid）技術(shù)。這種基質(zhì)由無機硅膠與有機聚合物在亞微米尺度上雜化而成，具有好的機械強度和化學(xué)穩(wěn)定性。

粒徑與孔徑：填料粒徑為1.7 μm，這是實現(xiàn)UPLC快速、高效分離的基礎(chǔ)。常規(guī)分析應(yīng)用的孔徑為130 ?，此外還有專門為分析完整糖蛋白設(shè)計的300 ?大孔徑產(chǎn)品。

鍵合相：柱床鍵合了化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的三官能團鍵合酰胺基（Amide）固定相。與傳統(tǒng)的硅膠氨基柱相比，這種酰胺鍵合相在水相環(huán)境中不易水解流失，且不會與還原性糖發(fā)生反應(yīng)生成希夫堿（Schiff base），從而保證了定量的準(zhǔn)確性。

2. 色譜分離模式與機制

親水作用色譜（HILIC）：這是該色譜柱的主要工作模式。其機制是使用如水/乙腈等高有機相比例的流動相，固定相表面的水層與流動相之間發(fā)生分配作用，從而實現(xiàn)極性分析物的保留。

正交選擇性：它提供與反相色譜不同的分離選擇性，二者互為正交分離模式。對于在反相色譜中不保留的強極性化合物，在HILIC模式下可獲得良好的保留與分離度。

3. pH耐受范圍與穩(wěn)定性

該色譜柱具有極寬的流動相pH耐受范圍（pH 2-11或pH 2-12）。這種高pH穩(wěn)定性得益于BEH雜化顆粒技術(shù)，使得分析方法可以利用高pH條件來調(diào)節(jié)極性可電離化合物的保留行為和選擇性，同時也可以使用高溫（如60℃）來改善峰形（例如解決還原性糖的差向異構(gòu)體分離問題）并縮短分析時間。

4. 主要應(yīng)用領(lǐng)域

Q極性化合物分析：包括但不限于碳水化合物（單糖、二糖、寡糖、多糖）、水溶性WEI生SU、有機酸、核苷以及各種強極性的藥物代謝產(chǎn)物。

糖類與糖蛋白分析：非常適用于食品中糖分的測定。其大孔徑版本（300 ?）是專門針對完整糖蛋白、糖肽以及單克隆抗體（mAb）的糖型分離而優(yōu)化的，可在糖基化位點水平提供結(jié)構(gòu)信息。

藥物分析：例如用于分析erjia雙胍（Metformin）及其相關(guān)物質(zhì)等強極性藥物及其雜質(zhì)。

5. 與檢測技術(shù)的兼容性

質(zhì)譜（MS）兼容性：HILIC模式所用的高有機相流動相（如乙腈）有利于電噴霧離子化（ESI）過程中的脫溶劑和離子化效率，因此能顯著提高質(zhì)譜檢測的靈敏度。同時，由于該柱耐高pH，可以簡化樣品前處理，有時可避免使用離子對試劑，使LC-MS分析更加直接和靈敏。

通用型檢測器兼容：與示差折光檢測器（RI） 和蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD） 等通用型檢測器兼容良好。

6. 規(guī)格與分類

UPLC/HPLC兼容性：ACQUITY UPLC BEH Amide專用于UPLC系統(tǒng)（耐壓高達18000 psi/1240 Bar）。其對應(yīng)的HPLC規(guī)格產(chǎn)品為XBridge Amide系列，兩者具有相同的固定相化學(xué)，可實現(xiàn)方法在HPLC與UPLC平臺間的無縫轉(zhuǎn)換。

USP分類：根據(jù)美國藥典色譜柱分類，其屬于 L68 類別。

ACQUITY UPLC BEH Amide色譜柱

186004848

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，1.0 × 50mm

186004849

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，1.0 × 100mm

186004850

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，1.0 × 150mm

186004839

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，2.1 × 30mm

186004800

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，2.1 × 50mm

186005657

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，2.1 × 75mm

186004801

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，2.1 × 100mm

186004802

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，2.1 × 150mm

186004803

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，3.0× 30mm

186004804

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，3.0× 50mm

186005658

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，3.0× 75mm

186004805

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，3.0× 100mm

186004806

ACQUITY UPLC BEH Amide，1.7μm，3.0× 150mm

ACQUITY UPLC BEH Amide色譜柱